Quais são os métodos de disrupção celular?

Aug 24, 2018

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Pressão de cisalhamento líquido:


Quebra de células por queda rápida de pressão causada pela transferência de uma amostra de uma câmara de alta pressão para uma câmara de baixa pressão


Vantagens: esmagamento rápido e eficaz, adequado para quebra de células de grande volume


Desvantagens: pode causar a temperatura da amostra a subir (sistema de refrigeração é necessário para a operação)


Ultra-som


Esmagando células por perturbação ultra-sônica de alta freqüência


Vantagens: operação simples


Desvantagens: Pode causar o aumento da temperatura da amostra, é difícil resfriar através do sistema de resfriamento, a força de cisalhamento pode causar danos às proteínas, o ruído é mais alto e a quantidade de quebra é pequena.


Contas de vidro


Moagem de células com agitação de esferas de vidro


Vantagens: Muito útil para células que são difíceis de quebrar, como levedura


Desvantagens: algumas são lentas e barulhentas


Pressão osmótica


De alta pressão osmótica a baixa pressão osmótica


Vantagens: fácil de operar, baixo custo


Desvantagens: apenas para células com paredes externas fracas (como células animais)


Congelamento e descongelamento repetidos


Quebrar as células formando repetidamente cristais de gelo; usualmente lise de células sob o método enzimático


Vantagens: fácil de operar, baixo custo e muitos fragmentos de membrana celular


Desvantagens: lenta, pode danificar proteínas sensíveis ou interromper a interação entre proteína e membrana celular, baixo rendimento


Clivagem enzimática


Frequentemente usado em conjunto com outras tecnologias, tais como repetidas congelamento-descongelamento ou esmagamento osmótico; A lisozima é a enzima mais comumente usada para quebrar as paredes celulares bacterianas.


Vantagens: leve, pode produzir grandes fragmentos de membrana celular


Desvantagens: lento, baixo rendimento


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