Etapas experimentais para fermento quebrado

Materiais experimentais: levedura, tampão fosfato de sorbitol (Na2HPO4: NaH2PO4 = 77,4: 22,6), enzima caracol e celulase.

Procedimento experimental: 2 ml de solução bacteriana foram tomadas em um tubo de coleta de 2,5 ml, centrifugados a 12000 rpm por 1 min, e o sobrenadante foi descartado, e o procedimento foi repetido uma vez. Ressuspender as células, adicionando 1 ml de tampão para o tubo de centrifugação e, em seguida, tomar 20 ul da solução bacteriana. Observar a morfologia inicial da parede celular das células de levedura sob um microscópio de luz e, em seguida, organizar a solução de enzima (enzima caracol: cellulase = 50: 10 ul). Banho-maria em banho-maria a 37 graus por 1 h (durante o período para evitar a precipitação de bactérias, o tubo centrífugo pode ser agitado regularmente)

Após a conclusão do banho de água, 20 ul de líquido bacteriano foram retirados em um tubo de centrífuga para observar as alterações morfológicas da parede celular e membrana celular da célula de levedura sob um microscópio de luz, e então o pulverizador de células ultra-sônicas foi usado para romper o líquido bacteriano no tubo de centrifugação, e o procedimento específico foi ajustado ao poder. 300w, tempo de trabalho 10min, ultra-som aberto 3S, ultrassônico off 3S, alarme temperatura 70 graus, os parâmetros específicos podem ser ajustados de acordo com a situação real, após o ultra-som para tomar o líquido bacteriano para fazer a última peça, tomar 20ul de bactérias líquido sob o microscópio de luz para observar a parede celular da levedura E as mudanças morfológicas na membrana celular.

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