Princípio da tecnologia de instrumento de PCR

A sonda Taqman marcada com fluoresceína é misturada com o DNA molde para completar o ciclo térmico de desnaturação a alta temperatura, renaturação a baixa temperatura, extensão moderada da temperatura e a regra de reação em cadeia da polimerase é seguida. A sonda Taqman complementar ao DNA molde é clivada e fluorescente. O pigmento é livre no sistema de reação e emite fluorescência sob fotoexcitação específica. À medida que o número de ciclos aumenta, o fragmento do gene alvo amplificado cresce exponencialmente e a intensidade do sinal de fluorescência muda com a amplificação medida pela detecção em tempo real. O valor de CT é obtido e, ao mesmo tempo, usando uma pluralidade de padrões de concentrações de molde conhecidos como um controle, o número de cópias do gene da amostra a ser testada pode ser obtido.